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1. 菲优特检测:抑菌试验(牛津杯法)(哔哩哔哩,2024-05-14发布)
完整演示牛津杯法操作流程,包括培养基制备牛津杯放置抑菌剂添加及结果测量。[观看链接] 2. 牛津杯法抑菌实验标准化操作(哔哩哔哩,2023-12-17发布)
重点解析操作细节(如防漏液技巧菌层平整控制),时长9分54秒。搜索关键词:"牛津杯法抑菌实验" 二牛津杯法详细操作步骤(文字版要点)
(1)培养基制备
底层培养基:取直径90mm培养皿,注入15mL熔化的50℃琼脂培养基(如LB琼脂),水平凝固。菌层培养基:将受试菌(如大肠杆菌)悬液加入冷却至48-50℃的培养基中,混匀后吸取5mL铺于底层上,确保表面平整。(2)牛津杯放置
方向识别:牛津杯正面有凸点及"海博生物"标识,反面为平面。操作要点:用无菌镊子夹住凸点,轻压放置于凝固菌层上,确保4个小杯与培养基无缝隙(⚠️防漏液关键)。
(3)抑菌剂添加与培养
向牛津杯内加入不同浓度抑菌剂(如益生菌发酵液抗生素)。平稳移入培养箱(如37℃),避免晃动,培养16-24小时。(4)结果测量
培养后测量抑菌圈直径(单位:mm),使用游标卡尺或直尺。抑菌效果分级标准:| 抑菌圈直径(mm) | 抑菌效果等级 | 敏感度 |
||--||
| >20 | +++ | 极敏感 |
Z6尊龙凯时旗舰厅| 15-20 | ++ | 高度敏感 |
| 10-15 | + | 中度敏感 |
| <10 |
| 耐药/无抑菌作用 |*数据来源:*
⚠️ 三注意事项及常见问题
1. 防漏液关键:
菌层表面需绝对水平,否则易导致抑菌剂侧漏。放置牛津杯后需轻压中央,确保杯底与培养基紧密接触。2. 菌悬液浓度:
病原菌悬液浓度建议调整至10⁶-10⁷ CFU/mL(麦氏比浊法校准)。3. 替代方法:
若无双层平板条件,可采用均匀混菌的单层琼脂(菌液加入40℃培养基混匀后倒板)。